研究前沿 | 茯苓減輕哮喘模型小鼠的氣道炎癥

發(fā)布時(shí)間：2021-11-19

變應(yīng)性疾病是一組由免疫系統(tǒng)對(duì)無害的過敏原產(chǎn)生異常反應(yīng)而引起的疾病，在世界范圍內(nèi)日益普遍。過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、食物過敏和過敏性哮喘是最常見的變應(yīng)性紊亂。變應(yīng)性疾病的分子和細(xì)胞機(jī)制表明對(duì)環(huán)境物質(zhì)作出適當(dāng)和平衡的免疫反應(yīng)的重要性。

變應(yīng)性疾病與2型T輔助細(xì)胞（Th2）對(duì)過敏原的免疫應(yīng)答異常密切相關(guān)，其特征是Th2特異性細(xì)胞因子的分泌增多，包括白細(xì)胞介素4（IL-4）、IL-5和IL-13。T輔助細(xì)胞(Th細(xì)胞)被認(rèn)為是過敏性炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵因素，尤其是Th2細(xì)胞。當(dāng)遇到過敏原時(shí)，受刺激的氣道上皮細(xì)胞激活Th2細(xì)胞并釋放特定的細(xì)胞因子，而Th2細(xì)胞因子反過來促進(jìn)其他Th細(xì)胞因子的釋放，擴(kuò)大炎癥反應(yīng)。此外，Th2分泌的細(xì)胞因子(IL-4、IL-5、IL-13)進(jìn)一步觸發(fā)一系列免疫反應(yīng)，包括嗜酸性炎癥免疫球蛋白E (IgE)表達(dá)、杯狀細(xì)胞增生、氣道黏液分泌等，這些是過敏性疾病包括過敏性哮喘最顯著的特征。

茯苓（Poria cocos (Schw.) Wolf）是一種腐生真菌，已被廣泛用作傳統(tǒng)中草藥，其提取物具有抗高血糖、抗癌、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性。茯苓中可分離出兩大類化合物：三萜和多糖。多項(xiàng)研究表明，茯苓抗炎活性主要由富含三萜的組分介導(dǎo)，免疫調(diào)節(jié)活性主要依賴于富含多糖的組分。盡管有報(bào)道稱茯苓具有抗炎和免疫調(diào)節(jié)特性，但對(duì)過敏性哮喘的作用尚不清楚。在亞洲，茯苓是一種常見的食用菌，市場(chǎng)上通常以干粉或膠囊的形式出售。此外，茯苓不僅用于治療疾病，還作為日常補(bǔ)充劑用以改善健康。此外，之前的研究表明，含有羊毛脂烷型三萜的茯苓提取物(Lipucan?)在免疫調(diào)節(jié)活性中發(fā)揮了有益的作用。

圖片關(guān)鍵詞

圖1. 從茯苓中分離得到的羊毛脂烷型三萜化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

本研究首次證實(shí)了茯苓提取物的抗過敏和抗哮喘作用。

將小鼠隨機(jī)分成5組，每組10只，分別為哮喘組、茯苓提取物外給藥組(FL-800、FL-1200、FL-1600)和潑尼松龍組。從8周齡開始，連續(xù)給小鼠分別灌胃35天。于第1、10、20天腹腔注射10、10和50μg 卵清蛋白（OVA）于磷酸鹽緩沖鹽水聯(lián)合佐劑氫氧化鋁致敏。在第33和34天，小鼠在一個(gè)與霧化器相連的密閉室中，在連續(xù)的氣溶膠流動(dòng)下，用2%的OVA氣溶膠刺激20分鐘。每次OVA致敏后，通過眼眶取血檢測(cè)OVA特異性IgE，采用ELISA法證實(shí)誘導(dǎo)過敏性哮喘。對(duì)OVA致敏小鼠灌胃對(duì)照品、茯苓提取物(FL-800、FL-1200、FL-1600)和陽性對(duì)照潑尼松龍(5mg/kg)。茯苓提取物的各組小鼠灌胃5 d /周，連續(xù)5周。陽性對(duì)照組在處死前5天每日管飼潑尼松龍。

最后一次OVA吸入刺激后，處死小鼠。之后進(jìn)行支氣管肺泡灌洗液（BALF）分析和組織學(xué)分析，測(cè)定BALF中的嗜酸細(xì)胞活化趨化因子、IL-5、LTC4、PGE2以及總IgE、IgA、IgM、IgG和OVA特異性IgE，評(píng)價(jià)自然殺傷（NK）細(xì)胞活性并測(cè)定脾細(xì)胞和BALF培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子的水平。

圖片關(guān)鍵詞

圖2. 卵清蛋白誘導(dǎo)的小鼠氣道炎癥的方案示意圖，以及用茯苓提取物和潑尼松龍(第30 - 34天)治療的方案。

在肺組織切片的組織學(xué)分析中，與哮喘組相比，茯苓提取物組明顯觀察到支氣管周圍和細(xì)支氣管周圍區(qū)域的炎癥細(xì)胞浸潤減少。延長茯苓提取物給藥時(shí)間顯著降低了嗜酸性粒細(xì)胞浸潤、PGE2水平、總IgE和OVA特異性IgE。此外，茯苓提取物可顯著抑制Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-5和IL-10。另一方面，茯苓提取物通過Th1免疫反應(yīng)顯著提高了IL-2的分泌，并且較低劑量的茯苓提取物提高了IFN-γ水平。實(shí)驗(yàn)中還觀察到茯苓提取物提高了NK細(xì)胞的活性。